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技術文章

肌糖原的酵解作用

點擊次數:1396 發布時間:2009-11-16

一、實驗目的
(1)學習檢定糖酵解作用的原理和方法。
(2)了解酵解作用在糖代謝過程中的地位及生理意義。
二、實驗原理 
在動物、植物、微生物等許多生物機體內,糖的無氧分解幾乎都按*相同的過程進行,本實驗以動物肌肉組織中肌糖元的酵解過程為例。肌糖元的酵解作用,即肌糖元在缺氧的條件下,經過一系列的酶促反應zui后轉變成乳酸的過程。肌肉組織中的肌糖元首先與磷酸化合而分解,經過己糖磷酸脂、丙糖磷酸脂、丙酮酸等一系列中間產物,zui后生成乳酸。該過程可綜合在下列反應式:
1/n(C6H5O5)n+H2O→2CH3CHOHCOOH
                糖元                            乳酸
肌糖元的酵解作用是糖類供給組織能量的一種方式。當機體突然需要大量的能量,而又供氧不足(如劇烈運動時),則糖元的酵解作用暫時滿足能量消耗的需要。在有氧條件下,組織內糖元的酵解作用受到抑制,而有氧氧化則為糖代謝的主要途徑。
糖元酵解作用的實驗,一般使用肌肉糜或肌肉提取液。在用肌肉糜時,必須在無氧的條件下進行;而肌肉提取液,則可在有氧條件下進行。因為,催化酵解作用的酶系統全部存在于肌肉提取液中,而催化呼吸作用(即三羧酸循環)的酶系統,則集中在線粒體中,糖元可用淀粉代替。
三、試劑與器材
試管、恒溫水浴、沸水浴、水浴、研缽、玻璃器皿等。0. 5%糖元溶液(或0.5%淀粉溶液)、液體石蠟、15%偏磷酸溶液、氫氧化鈣(粉末)、濃硫酸、飽和硫酸銅溶液。1/15 mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH8.0)。1/15 mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH7.4)、對羥基聯苯試劑;
四、操作方法處
死動物→制備肌肉糜→肌肉的糖酵解→乳酸的測定
五、關鍵步驟與注意事項
① 動物處死后,應立即進行實驗,防止酶失活。
② 測定時所用的儀器應嚴格洗滌干凈。
 

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